फेनिलगैलेक्टोसाइड CAS:2818-58-8

एंजाइम गतिविधि पर प्रभाव: फेनिलगैलेक्टोसाइड का उपयोग आमतौर पर एंजाइम β-गैलेक्टोसिडेज़ की गतिविधि को मापने के लिए किया जाता है।जब फेनिलगैलेक्टोसाइड को β-गैलेक्टोसिडेज़ द्वारा हाइड्रोलाइज किया जाता है, तो यह पी-नाइट्रोफेनॉल छोड़ता है।पी-नाइट्रोफेनॉल के संचय को मात्रात्मक रूप से मापा जा सकता है, जो β-गैलेक्टोसिडेज़ की गतिविधि में अंतर्दृष्टि प्रदान करता है।इस प्रभाव का उपयोग एंजाइम परख और स्क्रीनिंग सिस्टम जैसे अनुप्रयोगों में किया जाता है।

जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण: फेनिलगैलेक्टोसाइड का उपयोग अक्सर जीन अभिव्यक्ति का अध्ययन करने के लिए आणविक जीव विज्ञान प्रयोगों में एक सब्सट्रेट के रूप में किया जाता है।लैक्ज़ जीन, जो β-गैलेक्टोसिडेज़ को एनकोड करता है, आमतौर पर रुचि के अन्य जीनों के नियामक अनुक्रमों के साथ जुड़ा होता है।लैक्ज़ जीन की अभिव्यक्ति और β-गैलेक्टोसिडेज़ द्वारा फेनिलगैलेक्टोसाइड की हाइड्रोलिसिस अध्ययन किए जा रहे लक्ष्य जीन की अभिव्यक्ति पैटर्न और स्तर का संकेत दे सकती है।

स्क्रीनिंग सिस्टम: फेनिलगैलेक्टोसाइड स्क्रीनिंग सिस्टम का एक महत्वपूर्ण घटक है जो β-गैलेक्टोसिडेज़ गतिविधि का उपयोग करता है।एक व्यापक रूप से ज्ञात उदाहरण नीली-सफ़ेद स्क्रीनिंग विधि है, जिसका उपयोग आणविक जीव विज्ञान प्रयोगों में पुनः संयोजक या रूपांतरित कोशिकाओं की पहचान करने के लिए किया जाता है।जिन कालोनियों ने पुनः संयोजक डीएनए को सफलतापूर्वक ले लिया है या आनुवंशिक पुनर्संयोजन से गुजर चुके हैं, वे β-गैलेक्टोसिडेज़ को व्यक्त करेंगे, जिससे फेनिलगैलेक्टोसाइड का हाइड्रोलिसिस होगा और नीले रंग का निर्माण होगा।

प्रोटीन शुद्धि: कुछ मामलों में, फेनिलगैलेक्टोसाइड का उपयोग एफ़िनिटी क्रोमैटोग्राफी के लिए लिगैंड के रूप में किया जा सकता है ताकि उन प्रोटीनों को शुद्ध किया जा सके जो विशेष रूप से β-गैलेक्टोसिडेज़ से जुड़ते हैं या सक्रिय होते हैं।रुचि के प्रोटीन में एक एफ़िनिटी टैग या एक फ़्यूज़न टैग हो सकता है जिसमें β-गैलेक्टोसिडेज़-बाइंडिंग डोमेन होता है।स्थिर फेनिलगैलेक्टोसाइड के साथ एक स्तंभ के माध्यम से प्रोटीन मिश्रण को पारित करके, वांछित प्रोटीन को चुनिंदा रूप से बनाए रखा जा सकता है और बाद में निषेचित किया जा सकता है।